PCR实验，即临床基因扩增实验，是专门用来检验病原体感染的一种手段。它通过将体内所含的病毒基因进行扩增的方法，测出感染者体内是否含有特定的病毒。因涉及到各类病原体的检测，实验室的消毒工作不容忽视。所有PCR实验室的平面布局、空调通风系统设计、气流控制等也都是围绕同一个核心问题进行——“避免污染”。
　　PCR实验的污染来源都有哪些？
　　1．样本间交叉污染：收集样本的容器被污染或样本密封不严导致外溢；不同样本移液时忘记更换枪头；移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌；不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散，相互交叉污染。
　　2．实验试剂污染：主要是在 PCR 组分试剂加样过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。
　　3．扩增产物污染：大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖，这是PCR反应中最主要、最常见的污染问题。
　　防止实验污染都有哪些措施？
　　1．正确佩戴手套：手套未紧密贴合拇指、食指和中指，在进行开盖操作时容易发生交叉污染。
　　2．正确使用生物安全柜：实验用品摆放简单、整洁、避免通风口堵塞；操作前后紫外线照射，消毒剂随手可及；及时清理废弃物，保证废弃物不超过垃圾桶体积的2/3。
　　3．核酸提取仪去污染：每天多批次检测时，在每一批次检测完以后必须用75%的乙醇对仪器进行去污染。
　　4．重视通风：不定期对房间进行通风，每次至少持续30min。
　　5．PCR扩增区去污染：PCR反应管必须盖紧，避免扩增后的核酸对环境的污染。
　　PCR实验室的空气流向管理与环境消毒？
　　PCR实验室可分为试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区四个区域，这四个区域在物理空间上必须完全相互独立，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。所以，临床基因扩增检验实验室的空气流向应按：试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区，应时刻防止扩增产物顺空气气流进入扩增前区域。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
　　1．基本原则：由清洁区向污染区进行，洁具不可交叉。
　　2．清洁消毒方向：准备区→标本制备区→扩增区→产物检测区
　　3．清洁消毒范围：工作区域的物体表面(含桌、椅)，可使用含氯消毒剂擦拭消毒，空气和工作台面可使用紫外线照射消毒，也可使用空间消毒器进行全环节消毒。
　　4．不可使用紫外线消毒器及化学消毒剂在有人状态下的消毒。
　　5．PCR室内的消毒应防止扬尘（减少人员走动）、杀灭DNA或RNA的基因片段。可选择悬挂紫外线灯管进行空气消毒，试验前照射30-60分钟，实验结束照射30-60分钟，必要时延长照射时间。
　　6．终末消毒：当出现实验室污染时，应按要求立即撤出相关人员，在无人情况下可使用化学消毒剂进行终末消毒，如熏蒸法：过氧乙酸1g/ m³加热熏蒸（湿度70-90%），密闭24小时；气溶胶喷雾：3%过氧化氢：20mL/m³气溶胶喷雾；5%过氧乙酸2.5mL/m³气溶胶喷雾（湿度20-40%）。
　　日常清洁消毒应该如何做？
　　1．每日工作前后，对工作区域表面、地面进行清洁并消毒，使用含氯消毒液擦拭。
　　2．配备移动紫外线消毒装置进行空气和物表的消毒。
　　3．生物安全柜的消毒：每天工作前对生物安全柜的内表面进行消毒，包括工作台面和内壁使用消毒剂擦拭。
　　4．工作结束：柜内物品全部消毒后移出。消毒剂擦拭台面四周、以及玻璃内侧灯部位。
　　5．消毒剂应选择能够杀死生物安全柜里可能发生的任何微生物（70%乙醇、含氯消毒剂）。在使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还应用无菌水再次进行擦拭。
　　6．停用生物安全柜前，运行5min以净化内部空气。
　　7．终末消毒：需要进行终末消毒时。
　　试验完成后，物品及环境如何处理？
　　1．做好废液及固废处理：PCR实验室中的固体废弃物必须先经过高压蒸汽灭菌后再按医疗废物进行处理。
　　2．实验室空间消毒：在室温，50-60%湿度条件下，使用过氧乙酸熏蒸2g/m³，过夜；或使用20g/l气溶胶喷雾，用量8g/m³。
　　3．物体表面消毒液：0.55%含氯消毒剂，现用现配，24小时内使用。

                                                       
遗传室：贾雨薇